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影响荧光光度计的测验结果的因素有哪些

更新时间:2022-09-07浏览:2843次

  荧光光度计极容易受到各种因素的影响与干扰, 其故障表现多为空白荧光强度过高且不稳定。
  试剂影响
  1.1 介质的影响
  故障表现为测定某种元素前,试剂空白测试时,经常出现荧光强度在1000~ 8000范围内大幅度波动的现象,甚至导致超出仪器的测量范围而提示信号溢出。
  在排除仪器流路和容器污染以及实验用水因素后,配制不同浓度的酸溶液上机试验,如果荧光强度值随酸度降低而成比例减小,即可确定上述故障现象由介质所导致。
  此故障在更换合格介质后仪器多能自动恢复正常。
  由此建议,原子荧光仪器在整个实验过程使用的酸为优级纯,为达到满意的实验结果,应简化实验步骤。若实验方法允许,可将样品处理、标准系列配制和载流所用介质保持一致,以便将介质影响降到最小。
  1.2 还原剂的影响
  原子荧光还原剂一般采用硼氢化钾-氢氧化钠溶液或硼氢化钠-氢氧化钠溶液。还原剂配制浓度过高或存放时间过久也可导致荧光强度大幅度波动,但不会明显随介质浓度而变化。
  a.由于硼氢化钾溶液的浓度越大越容易引起液相干扰,所以要尽可能采用较低的硼氢化钾浓度。
  b.由于硼氢化钾的水溶液不稳定并且浓度越低越不稳定,因而必须加入氢氧化钾来提高其稳定性。但是氢氧化钾的量过大时会降低反应时的酸度而急剧降低仪器检测的灵敏度。因此,配制还原剂溶液时,应注意掌握二者比例。现较多采用2%硼氢化钾与0.5%~ 1%的氢氧化钠溶液作为还原剂。
  c.因上述试剂具有较强腐蚀性且稳定性差,所以应现用现配
  1.3重铬酸钾的影响
  表现为:试剂空白测试正常,配制标准系列溶液后按浓度顺序上机检测,标准曲线点与标称浓度不呈梯度关系,高低无序;标准曲线呈明显锯齿状。
  仅更换重铬酸钾试剂,故障即排除。
  实验用水
  实验用水的质量也严重影响试剂空白值的稳定性。尤其值得注意的是即使实验用水通过电导率仪甚至离子色谱检测均合格,也可导致试剂空白偏高正常值3~ 5倍情况的发生。
  实验容器
  容器污染表现为空白值高且极不稳定。因此,原子荧光实验所用器皿清洗要求极为严格,实验前必须将所用玻璃容器泡入15%的硝酸溶液中24h,然后用纯水仔细清洗备用。
  为避免交叉污染,用于原子荧光检测的玻璃容器应单独配制酸液浸泡并及时更换,禁止与其它检测器皿混用清洗液。
  环境因素
  环境汞的背景值可能对空白影响较大!
  如在汞检测过程中发生空白值很高并大幅度波动现象时,按常规方法排除其它干扰后,应重点检查是否由于破碎的温度计或日光灯、仪器室内高含量样品挥发、操作人员使用的化妆品以及排风不畅、与其它仪器共用排气管道交叉污染等原因造成局部环境汞含量高,从而导致仪器运行异常。故障排除可采用更换仪器安装场所、加大排风量等方法。

 

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