毛细管电泳仪的使用需遵循严格的步骤以确保实验的准确性和安全性,以下是具体操作流程:
1. 开机与初始化
将仪器放置在稳定水平台面,接通电源并预热30分钟。打开仪器开关和配套软件,进入控制界面。根据实验需求选择合适的检测器类型,并配置仪器参数(如电压、温度等)。
2. 毛细管处理与安装
用微吸管将毛细管插入样品槽,另一端接入高压电极接口。安装前需用超纯水、酸或碱溶液冲洗毛细管,去除杂质并平衡基线。例如,用1mol/L NaOH溶液冲洗5分钟,再用超纯水冲洗5分钟,确保毛细管畅通且无气泡。
3. 样品与缓冲液准备
将样品加入电泳缸的样品槽,注意避免超过容积。根据实验需求配制缓冲液,如10mmol/L NaH₂PO₄-Na₂HPO₄缓冲液,并倒入对应的缓冲液瓶。将样品槽和缓冲液瓶放入指定托盘,记录位置。
4. 参数设置与运行
在软件中设置电压、电流、进样时间等参数。例如,设置电压为25kV,进样压力30mbar,进样时间5秒。运行前检查检测器配置、灯状态及液体放置是否正确。启动电泳,观察基线平稳后开始进样。
5. 数据采集与分析
电泳完成后,保存数据文件。使用软件设置峰宽、阈值等参数进行数据处理,选择报告格式并打印。例如,通过外标法定量分析样品浓度。
6. 关机与维护
关闭电压,取出毛细管和样品,用超纯水冲洗毛细管10分钟。清洗电泳缸和配件,关闭仪器开关和计算机,切断电源。长期不使用时,需按说明书保存仪器。
注意事项
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